10.3969/j.issn.1005-4561.2017.08.005
白藜芦醇增强乳腺癌细胞对γδT细胞的敏感性及其机制研究
目的 探讨γδT细胞对乳腺癌细胞的杀伤活性,观察白藜芦醇增强γδ T细胞的抗肿瘤活性.方法 体外扩增培养人γδT细胞并用流式细胞术进行鉴定.实验分为对照组、白藜芦醇组、γδT细胞组、白藜芦醇+γδT细胞组及白藜芦醇+γδT细胞+c-FLIP质粒组.LDH释放实验检测γδT细胞对MDA-MB-231乳腺癌细胞的杀伤活性;western blot实验检测白藜芦醇及γδT细胞处理后MDA-MB-231细胞的细胞Fas-相关性死亡结构域样白介素-1β转换酶抑制蛋白(c-FLIP)的表达水平、活化半胱天冬酶(caspase)8、caspase 9、caspase 3的活化和细胞色素c的释放.结果流式细胞实验结果显示在体外用BrHPP和IL-2培养14天的人单个核细胞、CD3和γδTCR,确定这些定向培养的效应细胞为γδT细胞.LDH释放实验显示γδT细胞+白藜芦醇组对MDA-MB-231的杀伤活性为(68.2±7.1)%,显著高于γδT细胞组的(21.4±3.2)%(P<0.05)和白藜芦醇+γδT细胞+c-FLIP质粒组的(27.9±3.6)%(P<0.05).Western blot实验结果显示白藜芦醇处理能显著降低MDA-MB-231细胞中c-FLIP蛋白的表达,γδT细胞+白藜芦醇组MDA-MB-231的活化caspase 8及细胞色素c的释放均显著高于γδT细胞组和白藜芦醇+γδT细胞+c-FLIP质粒组.结论 白藜芦醇下调乳腺癌细胞c-FLIP的表达,提高乳腺癌细胞对γδT细胞的敏感性.
乳腺癌、MDA-MB-231细胞、γδ T细胞、白藜芦醇、c-FLIP基因
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R95;R19
2017-09-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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