蛇床子素增强TNF-α对骨肉瘤细胞凋亡诱导活性及机制研究

摘要：

目的：观察蛇床子素增强肿瘤坏死因子对骨肉瘤细胞的凋亡能力及其机制。方法将骨肉瘤细胞系HOS分为对照组、TNF-α组及蛇床子素联合TNF-α组和蛇床子素+TNF-α+CYLD siRNA组；MTT法检测HOS细胞的细胞活力，Annexin V/PI染色检测HOS细胞的凋亡，免疫共沉淀联合Western blot法检测HOS细胞RIP1蛋白的泛素化，Western blot法检测HOS细胞caspase-8的活化和CYLD去泛素化酶的相对表达量。结果与对照组比较，TNF-α组、蛇床子素+TNF-α组对HOS细胞活力的抑制率增加[（12.5±0.9）％、（58.6±3.8）％比0，P﹤0.05]，TNF-α组、蛇床子素+TNF-α组对HOS细胞凋亡诱导率提高（8.3±0.5）％、（39.9±2.5）％比（1.9±0.3）％，P﹤0.05]，而蛇床子素+TNF-α+CYLD siRNA组的HOS细胞活力抑制率、HOS细胞凋亡诱导率均低于蛇床子素+TNF-α组[（22.1±1.2）％比（58.6±3.8）％，P﹤0.05；（13.5±0.9）％比（39.9±2.5）％，P﹤0.05]。与对照组、TNF-α组比较，蛇床子素+TNF-α组RIP1泛素蛋白相对表达量降低（0.28±0.02比1.00±0.07、0.81±0.06，P﹤0.05），蛇床子素+TNF-α组活化的caspase-8蛋白的相对表达量明显提高（0.46±0.04比0.01±0.01、0.08±0.02，P﹤0.05），蛇床子素+TNF-α组CYLD蛋白的相对表达量也明显增加（0.81±0.05比0.28±0.02、0.30±0.02，P﹤0.05）。与蛇床子素+TNF-α组比较，蛇床子素+TNF-α+CYLD siRNA组RIP1泛素蛋白相对表达量增加（0.77±0.05比0.28±0.02，P﹤0.05），显示CYLD siRNA能显著抑制蛇床子素对TNF-α的协同作用。结论蛇床子素通过上调去泛素化酶CYLD的表达水平，促进TNF-α依赖的RIP1蛋白的去泛素化，进而诱导骨肉瘤细胞caspase-8的活化和凋亡的发生。

关键词：骨肉瘤、蛇床子素、TNF-α、RIP1、去泛素化、caspase-8、细胞凋亡

所属期刊栏目：26

分类号：S85;R73

在线出版日期：2016-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：984-987