毛囊干细胞体外培养体系的建立

摘要：

目的：建立一套可行的毛囊干细胞体外培养体系，获得高纯度的种子细胞，为构建新型人工皮肤积累实验数据。方法采用显微分离技术结合中性蛋白酶、四型胶原酶分离单个毛囊组织，分别接种于没有包被的24孔板（A组）、Matrigel基质胶包被的24孔板（B组）和成纤维细胞作为饲养层细胞的24孔板（C组），完全培养基培养细胞，然后采用IV型胶原差速贴壁法纯化毛囊干细胞，计算其黏附率，比较筛选前后细胞的增殖能力，并对其进行免疫荧光检测和Q-PCR检测与分析。结果通过显微切割技术结合中性蛋白酶和IV型胶原酶，分离单个毛囊组织，采用完全培养基Matrigel基质胶包被原代细胞培养，IV型胶原差速贴壁法分选纯化出的细胞，经过免疫荧光、细胞形态观察、Q-PCR检测，证实是毛囊干细胞，且增殖力强，可大量扩增。结论建立了一整套相对比较成熟的体外培养体系，为后期转染毛囊干细胞，构建复合人工皮肤，进行动物实验提供实验依据。

关键词：毛囊干细胞、IV型胶原、Q-PCR

分类号：R31;R75

资助基金：浙江省科技厅公益技术研究社会发展项目2010C330133

在线出版日期：2014-11-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：853-857