10.3969/j.issn.1005-4561.2009.12.006
体外诱导培养健康成人外周血单核细胞源树突状细胞及鉴定
目的:建立体外从健康成人外周血单核细胞(Mo)诱导培养成熟的树突状细胞(DC)的方法.方法:采用连续贴壁法分离正常人外周血单核细胞,在GM-CSF和IL-4的完全培养基中培养.培养5天后收集细胞,重新铺板后继续在TNF-α的完全培养基中培养48小时后,收集细胞和上清液,采用流式细胞术检测DC表型 CD80、CD83、CD40的表达;用ELISA法检测上清液中细胞因子IL-12的浓度;用倒置显微镜动态观察DC形态变化.结果:采用连续贴壁法和用GM-CSF、IL-4 和 TNF-α联合培养可以从人外周血诱导培养出大量的树突状细胞,且高表达CD80、 CD83、CD40,表达率分别为84.29%、90.73%、92.38%.DC分泌的细胞因子IL-12浓度为38.52±11.34pg/ml.结论:采用连续贴壁法和用GM-CSF、IL-4 和 TNF-α联合培养可以从人外周血诱导培养大量的树突状细胞,检测表型CD80、CD83、CD40的表达率和细胞因子IL-12浓度可以鉴定树突状细胞.
外周血、树突状细胞、体外培养、鉴、定
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R73;R-3
2010-01-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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