姜黄素保护急性肝损伤的作用及机制研究

摘要：

目的 基于线粒体自噬-核酸结合寡聚结构域样受体家族3(NLRP3)炎症小体通路研究姜黄素对急性肝损伤的可能保护机制,为其用于急性肝损伤的治疗提供理论依据.方法 30只雄性SD大鼠随机分为对照组、肝损伤组、姜黄素组、3-甲基腺嘌呤(3MA)组和姜黄素+3MA组,每组6只.除对照组外,其余4组腹腔注射脂多糖(LPS)/D-氨基半乳糖(D-GalN)建立肝脏损伤模型,对照组腹腔注射等体积的0.9％氯化钠注射液.建模前5天,姜黄素组和姜黄素+3MA组大鼠按5 mL/kg灌饲姜黄素药液,1次/d;对照组、肝损伤组和3MA组灌饲5 mL/kg的0.5％羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液.建模前2 h,3MA组和姜黄素+3MA组大鼠腹腔注射3.35 mL/kg的3MA,其余各组腹腔注射3.35 mL/kg的二甲基亚砜.造模后12 h,颈椎脱臼法处死大鼠并收取血液和肝脏组织.采用HE染色观察各组大鼠肝组织病理变化,采用流式细胞仪测量肝细胞线粒体膜电位,采用ATP试剂盒检测肝细胞线粒体ATP的水平,通过透射电镜观察肝细胞线粒体形态和自噬小体,采用免疫组化检测肝组织IL-1β表达情况,采用ELISA法检测血清IL-1β水平,采用Western blot法检测线粒体自噬相关蛋白Parkin、PTEN诱导假定激酶1(PINK1)以及炎症相关蛋白NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)和IL-1β的表达情况.结果 与肝损伤组相比,姜黄素组肝组织肿胀及点状坏死显著减少,炎症细胞浸润相对较轻,线粒体膜电位和ATP水平显著增高,线粒体损伤明显减轻,自噬体数量增加,肝组织IL-1β阳性细胞数及相应吸光度值显著下降,血清IL-1β含量显著下降,肝组织Parkin、PINK1蛋白灰度值显著上调,NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白灰度值显著下降,差异均有统计学意义(均P<0.05).与姜黄素组相比,3MA组和姜黄素+3MA组肝组织严重充血,可见点状坏死,肝细胞线粒体损伤加重,自噬体数量减少,IL-1β阳性细胞数及相应吸光度值显著上升,血清IL-1β含量显著增高,肝组织Parkin、PINK1蛋白灰度值显著下降,NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白灰度值显著上调,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 姜黄素对LPS/D-GalN诱导的急性肝损伤具有保护作用,其机制可能与激活线粒体自噬-抑制NLRP3炎性小体介导的炎症反应相关.

关键词：线粒体自噬、核酸结合寡聚结构域样受体家族3、姜黄素、肝损伤

所属期刊栏目：45

分类号：R363;R285.5;R742.5

资助基金：宁波市自然科学基金资助项目;宁波市青年技术骨干人才培养专项

在线出版日期：2023-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1467-1473,1478,后插1