基于NF-κB信号通路探究大黄酸对肺泡上皮细胞损伤的保护作用

摘要：

目的 探讨大黄酸对脂多糖(LPS)诱导的炎症损伤人肺泡上皮细胞增殖、迁移及NF-κB信号通路的保护作用.方法 体外培养A549细胞分为对照组(不做干预)、模型组(以10 μg/ml LPS刺激A549细胞24 h构建体外急性肺损伤细胞模型)、LPS+2、4、8 μmol/L大黄酸组(在模型组的基础上加2、4、8 μmol/L大黄酸),采用ELISA法及细胞计数试剂盒-8(CCK-8)测定细胞炎症因子水平和活力以筛选出大黄酸最适浓度(2 μmol/L).而后将细胞分为对照组(不做干预)、模型组(10 μg/ml LPS刺激A549细胞24 h)、大黄酸组(在模型组的基础上加2 μmol/L大黄酸进行干预)、BAY 11-7082组(在模型组的基础上加5 μmol/L BAY 11-7082进行干预)、抑制剂组(大黄酸组的基础上加5 μmol/L BAY 11-7082进行干预)和激活剂组[大黄酸组的基础上加1 μmol/L佛波酯(PMA)进行干预].24 h后,分别采用5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)、Transwell小室及Western blot法测定各组细胞增殖率、迁移数及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、细胞周期素D1(Cyclin D1)、NF-κB p65和磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)蛋白表达水平.结果 与模型组相比,LPS+不同浓度大黄酸组炎症因子IL-6、IL-1β水平均降低(均P＜0.05),细胞活力均升高(均P＜0.05).与对照组相比,模型组细胞增殖率、Cyclin D1蛋白表达水平均降低(均P＜0.05),细胞迁移数、Caspase-1、p-NF-κB p65蛋白表达水平均升高(均P＜0.05).与模型组相比,大黄酸组和BAY 11-7082组显著扭转了上述指标的变化(均P＜0.05).与大黄酸组相比,BAY 11-7082加强了、PMA则削弱了2 μmol/L大黄酸的作用(均P＜0.05).结论 大黄酸对LPS诱导的炎症损伤A549细胞具有保护作用,并促进细胞增殖和抑制细胞迁移,其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路有关.

关键词：急性肺损伤、脂多糖、大黄酸、核因子-κB、增殖

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分类号：R563.8;R329.28;R28

资助基金：广西中医药大学研究生教育创新计划项目2123210004

在线出版日期：2023-07-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1244-1248,1254,后插2