circ_0003159对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响及机制研究

摘要：

目的 探讨circ_0003159对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响及其作用机制.方法 选取2015年6月至2018年12月嘉兴市第二医院肿瘤外科经手术切除的30例患者的胃癌组织和配对的癌旁组织.采用qRT-PCR法检测胃癌组织和癌旁组织中circ_0003159、miR-32-5p和第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)的表达水平;以及胃癌细胞株(BGC823、AGS、MKN45)和正常胃黏膜上皮细胞株GES-1中circ_0003159的表达水平.选取circ_0003159表达水平最低的胃癌BGC823细胞系,建立circ_0003159超表达模型,设立circ_0003159超表达组(转染circ_0003159模拟物)和阴性对照组(转染空载体阴性对照物).采用CCK-8法和Transwell小室实验检测circ_0003159超表达对BGC823细胞增殖、侵袭和迁移的影响;生物信息学方法对circ_0003159或miR-32-5p进行靶基因预测,并通过双荧光素酶报告基因验证miR-32-5p与circ_0003159或PTEN的靶向关系;采用Western blot法检测过表达miR-32-5p对PTEN蛋白表达的影响.结果 胃癌组织中circ_0003159和PTEN的相对表达水平均明显低于癌旁组织(均P<0.05),但胃癌组织中miR-32-5p的相对表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05).胃癌细胞系BGC823、AGS、MKN45中circ_0003159的相对表达水平均明显低于正常胃黏膜上皮细胞GES-1(均P<0.05),且BGC823细胞中circ_0003159的相对表达水平最低.相比于阴性对照组,circ_0003159超表达组在48、72 h时OD450表达水平均明显下调(均P<0.05).与阴性对照组比较,circ_0003159超表达组中细胞侵袭数和迁移数均明显减少(均P<0.05).预测结果可知miR-32-5p为circ_0003159潜在的靶基因,PTEN是miR-32-5p潜在的靶基因.荧光素酶报告基因实验结果显示,与对照组比较,过表达miR-32-5p组中circ_0003159-MUT和PTEN-MUT相对活力值比较差异均无统计学意义(均P>0.05),而circ_0003159-WT和PTEN-WT相对活力值比较均明显下调(均P<0.05).与对照组相比,过表达miR-32-5p组中PTEN蛋白相对表达水平明显下降(P<0.05).结论 circ_0003159超表达显著抑制了胃癌细胞增殖、侵袭和迁移能力,其机制可能是通过靶向下调miR-32-5p对PTEN的抑制作用.

关键词：胃癌、增殖、侵袭、迁移、circ_0003159、miR-、32-、5p、第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因

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资助基金：嘉兴市科技计划项目2018AY32005

在线出版日期：2021-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：611-616