多发性骨髓瘤预后相关基因的鉴定及核心基因CLDN1的机制探讨

摘要：

目的 明确与多发性骨髓瘤(MM)患者预后相关的基因,并探讨相应的机制.方法 使用随机森林算法与Cox回归分析相结合的方法得到预后基因列表,并选定紧密连接蛋白1(CLDN1),通过构建CLDN1敲除载体,采用qRT-PCR法检测健康志愿者与MM患者中CLDN1 mRNA表达水平,Western blot检测CLDN1、转化生长因子-β3(TGF-β3)蛋白表达水平,Annexin V FITC/PI双染法检测细胞凋亡的变化,Transwell法检测细胞迁移的变化,CCK-8法检测细胞增殖的变化.论证CLDN1表达的变化对MM细胞系凋亡、增殖和迁移的影响.同时通过基因富集分析、相关性分析、Western blot、Transwell法证实CLDN1通过TGF-β3通路调控MM细胞系的迁移.结果 通过随机森林算法与Cox回归分析,得到25个与MM预后相关的基因,通过这些基因的表达能很好地预测患者的总体生存率,其中CLDN1不仅在25个预后相关基因中高表达,且在宁波市北仑区人民医院MM样本中始终高表达,在MM细胞系RPMP8226中CLDN1表达的缺失诱导了RPMP8226的凋亡,抑制了RPMI8226的增殖与迁移.与此同时,CLDN1高表达的样本中,细胞外基质相关通路高度富集,其中TGF-β3的表达与CLDN1的表达呈正相关,TGF-β3的表达不仅能够改变CLDN1的表达,且CLDN1对迁移的调控依赖于TGF-β3的表达.结论 25个预后相关基因能够预测患者生存,其中CLDN1基因与肿瘤发生、发展密切相关,而CLDN1的功能依赖于TGF-β3的表达.

关键词：预后相关基因、紧密连接蛋白1、转化生长因子-β3、多发性骨髓瘤

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资助基金：浙江省基础公益研究计划项目LGF19H200001

在线出版日期：2021-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：475-481