TLR4/MyD88信号通路介导LPS抑制CYP4X1表达的分子机制研究

摘要：

目的 体外实验探讨细胞色素P4504X1(CYP4X1)在炎性环境下的表达情况及其分子机制.方法 人胶质瘤细胞系U251细胞分别给予细菌脂多糖(LPS)联用Toll样受体4(TLR4)抑制剂CLI-095或髓样分化因子(MyD88)的抑制剂ST 2825处理24 h,采用qRT-PCR法检测U251细胞CYP4X1和过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPARγ)的表达;采用U251细胞瞬时转染人源PPARγ/核受体视黄醛X受体α(RXRα)表达质粒,双荧光素酶分析实验和染色质免疫共沉淀实验在转录水平上分析PPARγ调控CYP4X1表达的分子机制.结果 qRT-PCR结果显示,与空白对照相比,LPS(0.1、1μg/ml)呈剂量依赖性下调CYP4X1(下调38.60％、59.90％,均P<0.05)和PPARγ(下调25.17％、44.44％,均P<0.05)的表达;与单用LPS相比,CLI-095与ST 2825均下调了LPS对CYP4X1和PPARγ表达的抑制作用(均P<0.05).U251细胞瞬时转染实验显示,与空载组相比,转染组CYP4X1表达上调6.62倍(P<0.05);双荧光素酶分析实验显示,与空载组相比,转染组荧光强度明显上调9.63倍(P<0.05).染色质免疫共沉淀分析实验显示,与对照组相比,LPS抑制了PPARγ蛋白与CYP4X1启动子的结合,下调65.77％(P<0.05).结论 在U251细胞内LPS通过TLR4/MyD88信号通路抑制了PPARγ与CYP4X1启动子上过氧化物酶体增殖物反应元件的结合,进而在转录水平上抑制了CYP4X1的表达.

关键词：细胞色素P450酶、细胞色素P450 4X1、过氧化物酶体增殖剂激活受体、γ/核受体视黄醛X受体α、脂多糖Toll样受体、髓样分化因子

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资助基金：湖北省卫生健康委科研项目;十堰市科学技术研究;开发项目计划

在线出版日期：2021-03-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：377-382