大黄素联合5AzA-cdR对胰腺癌抑癌基因p16、RASSF1A去甲基化作用研究
目的 研究大黄素是否可增强5AzA-cdR对胰腺癌Panc1细胞抑癌基因p16、RASSF1A的去甲基化作用.方法 采用细胞增殖实验检测不同浓度大黄素对Panc1细胞的生长抑制情况,焦磷酸盐测序PCR(BSP)分别检测大黄素、5AzA-cdR及大黄素联合5AzA-cdR对Panc1细胞抑癌基因p16 、RASSF1A甲基化状态的影响,并用荧光定量PCR(FQ-PCR)和Western blot分别检测p16 、RASSF1A及甲基转移酶DNMT1、DNMT3a在mRNA和蛋白水平的表达情况.结果 大黄素以时间和浓度梯度依赖性抑制Panc1细胞生长.BSP结果显示大黄素具有微弱的去甲基化作用,5AzA-cdR具有一定程度的去甲基化作用,当两者联用时,去甲基化作用更加显著;FQ-PCR和Western blot结果显示大黄素与5AzA-cdR联用时,p16、RASSF1A的表达水平均较空白对照明显增高(均P＜0.05),DNMT1、DNMT3a的表达水平均较空白对照明显降低(均P＜0.05).结论 大黄素与5AzA-cdR联用可通过降低DNMT1和DNMT3a的表达水平来增强5AzA-cdR对胰腺癌抑癌基因p16、RASSF1A的去甲基化作用.
大黄素、胰腺癌、去甲基化、5AzA-cdR
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R73;X13
浙江省医药卫生科技计划项目2016KYB286
2016-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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