miR-99a对乳腺癌细胞侵袭和迁移的负向调控机制研究

摘要：

目的 探讨miR-99a对乳腺癌细胞侵袭及迁移的影响,并初步分析其影响乳腺癌细胞侵袭及迁移的可能分子机制.方法 利用荧光实时定量PCR检测乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7中miR-99a的表达.运用脂质体介导的转染方法分别将miR-99a模拟物(miR-99a mimics)、miR-99a抑制物(miR-99a inhibitors)以及相应对照miRNA转染MDA-MB-231和MCF-7细胞,通过Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭力;采用Transwell迁移实验及划痕实验检测细胞的迁移能力;利用生物信息学方法预测miR-99a的靶基因,并对靶基因进行验证.结果 (1)高转移潜能的MDA-MB-231细胞中miR-99a表达明显低于低转移潜能的MCF-7细胞,划痕实验中转染miR-99a mimics的与转染control mimics的MDA-MB-231细胞比较迁移能力显著减弱(P＜0.05),而MCF-7细胞转染miR-99a inhibitors后迁移能力明显增强(P＜0.01).(2)Transwell的侵袭及迁移实验显示,转染miR-99a mimics后MDA-MB-231细胞的侵袭和迁移能力明显减弱(P＜0.01);MCF-7细胞转染miR-99a inhibitors后迁移能力增强(P＜0.01),而侵袭能力基本不变(P＞0.05).(3)生物信息学方法预测微管相关蛋白(MTMR3)是miR-99a的靶点,实时定量PCR和3'UTR荧光素酶报告基因实验验证了该靶点.(4)干扰了MTMR3后MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力明显减弱.结论 (1) miR-99a对乳腺癌细胞的侵袭及迁移发挥负向调控作用.(2)miR-99a可能通过靶向于MTMR3发挥其对乳腺癌细胞迁移和侵袭的调控作用.

关键词：乳腺癌、miR-99a、侵袭、迁移、MTMR3

所属期刊栏目：38

分类号：R73;R28

资助基金：国家自然科学基金资助项目81373115

在线出版日期：2016-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：317-321,335,后插2