RNA干扰HIF-1α对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的VEGF表达及增殖的影响
目的 探讨shRNA特异性干扰沉默缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)的血管内皮生长因子(VEGF)表达及其增殖的影响.方法 获取9例RA患者滑膜组织进行RA-FLS的分离培养及传代.将FLS分为4组:常氧组、缺氧组、阴性质粒组(转染阴性质粒)和阳性质粒组(转染HIF-1α阳性质粒),常氧组进行常规培养,后3组进行缺氧培养12h;采用Western blot和qRT-PCR法分别检测各组FLS中HIF-1α和VEGF以及HIF-1α和VEGFmRNA表达情况.将缺氧组、阴性质粒组和阳性质粒组的FLS分别于缺氧条件下培养6、12、24、48h,应用MTT比色法检测各组细胞增殖情况.结果 与常氧组相比,缺氧组FLS的HIF-1α和VEGF以及HIF-1α和VEGFmRNA表达明显升高,差异均有统计学意义(均P＜0.05),而阴性质粒组和缺氧组FLS的HIF-1α和VEGF以及HIF-1α和VEGFmRNA表达水平无明显差异(P＞0 05);阳性质粒组FLS的HIF-1α和VEGF以及HIF-1α和VEGF mRNA较缺氧组下调,差异均有统计学意义(均P＜ 0.05).4组FLS的HIF-1α和VEGF以及HIF-1α和VEGF mRNA表达呈正相关(P＜0 01).缺氧培养12h后阳性质粒组的FLS生长较缺氧对照组及阴性质粒组减慢,差异有统计学意义(P＜0 05),而后两组FLS生长无统计学差异(P＞0 05).结论 RNA干扰HIF-1α表达能有效下调RA-FLS中HIF-1α和VEGF以及HIF-1α和VEGFmRNA水平,并且能抑制FLS的异常增殖.
类风湿关节炎、成纤维样滑膜细胞、RNA干扰、细胞增殖、缺氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子
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R59;R-3
宁波市社会发展科研项目基金资助2012C50010;宁波市自然基金项目2013A610259
2014-09-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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