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10.3969/j.issn.1006-2785.2010.08.026

NF2基因突变体真核表达载体的构建和表达

引用
目的构建NF2突变体真核表达载体,并观察其在人胚肾细胞HEK293中的表达.方法采用分子生物学方法构建NF2突变体,将突变体克隆入真核表达载体pEGFP-N1中,进行筛选和鉴定,然后在脂质体介导下,将重组载体转染至真核细胞HEK293中,应用Western blot法检测蛋白的表达.结果通过使用重叠延伸PCR法定位突变,从野生型NF2基因cDNA模板中扩增得到预期大小的NF2突变体条带,DNA测序证实NF2突变体序列的正确性.重组载体转染HEK293后能产生merlin蛋白.结论 本研究成功构建重组载体pEGFP-N1-NF2突变体,其转染HEK293后,能有效表达于HEK293中.

基因、增强型绿色荧光蛋白、真核表达

32

R73;S51

上海市科委启明星跟踪计划04qmh1414;上海市科委自然基金06ZR14064

2010-11-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共5页

1209-1212,彩插1

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浙江医学

1006-2785

33-1109/R

32

2010,32(8)

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