PMAP-23-LK-CBM3融合蛋白的原核表达、纯化与鉴定

摘要：

目的 构建抗菌肽-23与3型碳水化合物结合分子(CBM3)融合蛋白的原核表达载体并进行诱导表达、纯化和鉴定.方法 PCR扩增PMAP-23-LK-CBM3融合蛋白,产物经酶切、纯化、回收后与经同样双酶切并回收后的pET21a原核表达载体相连接,连接产物转化感受态DH5α菌,经菌落PCR筛选出阳性菌落并提取质粒进行初步酶切鉴定后进一步行双向测序鉴定,插入序列完全正确者命名为pET21a-PMAP-23-LK-CBM3重组载体,并将其转化感受态大肠埃希菌BL21(DE3),加入IPTG诱导PMAP-23-LK-CBM3融合蛋白表达后提取菌体蛋白行亲和层析纯化,并对纯化产物进行SDS-PAGE鉴定和Western Blot鉴定.结果 成功构建了pET21a-PMAP-23-LK-CBM3融合重组质粒,成功诱导、纯化并鉴定出PMAP-23-LK-CBM3融合蛋白,分子量与理论值相符.结论 成功表达并纯化、鉴定出了PMAP-23-LK-CBM3融合蛋白,为进一步将其应用于抗菌机制和药理实验的研究奠定了基础.

关键词：抗菌肽、表达、3型碳水化合物结合分子

所属期刊栏目：31

分类号：R33;S94

在线出版日期：2009-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：604-605,717