融合蛋白表达质粒pUL54S-EGFP的构建及在AD293细胞中的表达

摘要：

目的 探讨构建人巨细胞病毒(HCMV)截短UL54(UL54S)基因融合增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达质粒pUL54S-EGFP转染人胚肾293细胞,瞬时表达UL54S和EGFP的可行性.方法 采用PCR法扩增UL54s基因并将其克隆入真核表达载体pEGFP-N1中,采用脂质体法转染AD293细胞后通过荧光显微镜和流式细胞仪分析EGFP的表达情况.结果 重组质粒pUL54S-EGFP转染AD293细胞12h后即可见到荧光蛋白的表达,至48h表达达高峰;转染48h pUL54S-EGFP组平均转染率为47%.平均荧光强度为547.结论 重组质粒pUL54S-EGFP可在人胚肾293细胞内瞬时表达UL54S和EGFP融合蛋白,EGFP的表达可报告UL54基因的表达,质粒pUL54S-EGFP构建成功.

关键词：人巨细胞病毒、UL54基因、增强型绿色荧光蛋白

所属期刊栏目：30

分类号：S85;R39

资助基金：国家自然科学基金30571663

在线出版日期：2008-11-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：832-834,837