核酸适体检测赭曲霉毒素A荧光方法的建立

摘要：

赭曲霉毒素A（ Ochratoxin A ，OTA）普遍存在于谷物等粮食和动物饲料中，是一种可以引起癌症的霉菌毒素。为了快速检测OTA，利用荧光染料PicoGreen 识别双链DNA原理，建立了一种基于核酸适体与PicoGreen检测毒素OTA的方法。在10 mmol／L Tris，120 mmol／L NaCl，5 mmol／L KCl，20 mmol／L CaCl2（ pH 8.5）缓冲液中，PicoGreen与双链DNA结合后，释放的荧光在3 min内达到峰值（激发波长为480 nm，发射波长为520 nm）。从加样到荧光检测，整个流程可在40 min内完成。检测OTA的灵敏度为1μg／L；检测范围为1μg／L～200μg／L。特异性实验表明：OTA核酸适体-PicoGreen方法与黄曲霉毒素B1、伏马毒素B1、桔毒素和玉米赤霉烯酮等霉菌毒素无交叉反应。本方法在检测敏感性和特异性方面与传统抗体ELISA方法相当（Kappa值为：0．857）。由于核酸适体成本比抗体低，因此本方法比抗体ELISA方法更具实用价值。

关键词：赭曲霉毒素A、核酸适体、荧光、检测

分类号：Q503(一般性问题)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2012AA101602;浙江省大学生科技创新活动计划资助项目2014R412040;浙江农林大学人才启动项目2011FR025，2013FR012，2012FR047，2013FR076，2013FR054。

在线出版日期：2015-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1-4,5