一个植物半胱氨酸蛋白酶多克隆抗体的制备及其应用

摘要：

半胱氨酸蛋白酶(cysteine proteinase,CysP)是一类重要的蛋白酶家族,广泛参与植物多种生理过程.为了分析植物CysP的特性,本实验首先通过RT-PCR技术从本氏烟中扩增获得了一个编码CysP的基因(Nb-CysP)序列并连接至pEASYTM-T5 Zero载体,测序验证后亚克隆至原核表达载体pGEX-6P1,命名为pGEX-NbCysP;将其导入大肠埃希菌BL21plysS中诱导表达;重组表达的NbCysP融合蛋白经过亲和层析纯化,免疫兔子制备多克隆抗体,Western印迹分析显示,该抗体能和重组NbCysP蛋白发生强烈的免疫学反应且条带单一,表明所获得的CysP抗体具有良好的特异性.上述结果为进一步鉴定植物CysP的功能特性奠定了基础.

关键词：半胱氨酸蛋白酶、原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：30

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金3150160

在线出版日期：2018-07-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：881-885