基于SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR建立生乳及乳制品沙门氏菌快速检测技术

摘要：

生乳易受沙门氏菌污染,并大量繁殖；经加工的乳制品细菌数大大减少,但仍存在沙门氏菌污染的风险.试验按生乳及乳制品沙门氏菌污染水平研究样品前处理方法,采用煮沸裂解法快速提取总DNA,针对沙门氏菌invA基因建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR快速检测技术.建立的方法具有良好的特异性和较高的灵敏度,其中生乳沙门氏菌检出限为102 cfu· mL-1,方法的检测线性范围为102-108 cfu·mL-1,相关系数(R2)为0.999,扩增效率为103％;乳制品沙门氏菌经16 h增菌后检出限达到1 cfu·[25 g(mL)]-1.该技术可用于生乳中沙门氏菌的高效筛查及定量检测,检测一个样品仅需3 h；同时,可用于乳制品的准确定性检测,检测周期为1d；且方法重复性好、准确度高、操作简单,为乳制品企业快速检测沙门氏菌提供了有效的技术手段.

关键词：沙门氏菌、荧光定量PCR、SYBR Green Ⅰ、DNA提取、生乳、乳制品

所属期刊栏目：24

分类号：R155.57(营养卫生、食品卫生)

资助基金：浙江省公益技术应用研究项目2010C32024,2012C22069;农业部948项目2011G52

在线出版日期：2012-12-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：914-921