Methylocorus sp.MP 688菌株glyA基因体外表达及功能研究

摘要：

Methylocorus sp.MP 688菌株具有高产吡咯喹啉醌的特性而应用于工业生产当中.分析其全基因组及代谢通路,发现在C1固定中丝氨酸循环起到重要的生理作用.为了研究丝氨酸循环中glyA基因是否具有表达丝氨酸羟甲基转移酶(serine hydroxymethyltransferase,SHMT)活性及基因缺失是否会对菌株生命活动产生影响.采用体外表达方式,纯化并检测glyA基因产物SHMT酶是否具有催化活性.通过双交换实验进行glyA基因敲除,探究glyA基因缺失是否会对菌株产生影响.结果表明,glyA基因成功在体外表达,双交换敲除实验证明glyA基因作为关键基因存在,其缺失或可致死.此外,SHMT酶在35℃,pH值7.5缓冲体系中酶促效率最高,还原剂β-巯基乙醇对SHMT酶催化活性具有促进作用.

关键词：glyA基因、丝氨酸羟甲基转移酶、体外表达、双交换敲除

所属期刊栏目：59

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：河北省自然科学基金C2015201157,C2015201156;河北省高等学校科学技术研究项目BJ2016008

在线出版日期：2018-07-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1010-1014