水稻OsZFP互作蛋白的筛选与鉴定

摘要：

CCHC型锌指结构蛋白OsZFP参与调控水稻Oryza sativa侧根的生长发育,但其相关互作蛋白及调控机制未知.以水稻'日本晴''Nipponbare'为试验材料,克隆了OsZFP基因,利用EcoRI和SalI酶切位点构建酵母双杂交钓饵表达载体pGBKT7+OsZFP,验证该表达载体对酵母菌株Y2H无毒性及报告基因自激活现象;采用酵母双杂交技术,从已构建的水稻cDNA文库中筛选到1个阳性互作蛋白,经美国国家生物技术信息中心数据库(NCBI)同源性比对,鉴定为含有T-complex polypeptide 1(TCP-1)结构域的分子伴侣蛋白第7个亚基(Os06g0687700),命名为chaperonin containing TCP-1 eta subunit(CCT-eta),进而通过酵母一对一回复验证该互作蛋白.基于CCT-eta亚基与OsZFP蛋白互作,推测分子伴侣蛋白亚基CCT-eta可能参与调控水稻侧根的生长发育.

关键词：植物学、水稻、调控蛋白、载体构建、酵母双杂交、蛋白互作

所属期刊栏目：34

分类号：S511;Q943.2(禾谷类作物)

资助基金：国家自然科学基金青年基金资助项目31301272;浙江农林大学人才启动基金资助项目2013FR022;国家级大学生创新创业训练计划项目201510341001;浙江省高校生物学重中之重一级学科开放基金资助项目2015D19

在线出版日期：2017-12-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1024-1028