猪日本乙型脑炎病毒NS1基因的表达和抗体制备

摘要：

猪Sus scrofa domestica日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是引起母猪繁殖机能障碍的重要病原之一,其NS1蛋白参与病毒复制和组装、调节宿主免疫反应功能.提取猪日本乙型脑炎上海分离株的基因组RNA,反转录合成cDNA,扩增该病毒的NS1基因片段,亚克隆到原核表达载体pET-28(a)上,构建重组原核表达质粒pET-28(a)-JEV-NS1,转化大肠埃希菌Escherichia coli BL21 (DE3)菌株,IPTG诱导表达重组JEV-NS1蛋白,获得分子量大小为46 kDa的重组蛋白.为了提高表达量,JEV-NS1基因的958～1 245 bp被截短.聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表明:JEV-NS1表达量明显提高,纯化后含量达到总蛋白的85％以上.纯化后的蛋白免疫ICR小鼠Mus musculus,制备了小鼠抗JEV-NS1多克隆抗体,western-blotting验证了JEV-NS1的抗原性和抗体的特异性.

关键词：动物学、日本乙型脑炎病毒、NS1、原核表达、纯化、抗体

所属期刊栏目：30

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：浙江省自然科学基金资助项目Y3110124;浙江农林大学人才启动基金资助项目2010FR080

在线出版日期：2013-08-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：396-400