旱柳SRAP-PCR体系的建立与优化

摘要：

为了丰富柳树分子标记的手段,以旱柳Salix matsudana为材料,通过正交实验设计法,获得适于旱柳的相关序列扩增多态性(sequence-related amplified polymorphism,SRAP)-聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)体系;对SRAP-PCR扩增过程中的2次退火温度进行优化.结果如下:优化反应体系.25.00 μL反应液中,含20.84 nkat的Tap酶,2.00 μL Mg2+(25.00 mmol·L-1).2.50μL碱基混合物(脱氧核糖核苷酸dNTPs,各2.50 mmol·L-1),1.50μL引物(20.00 μmol·L-1),100.00 ng DNA模板.2.50μL 10×Tap酶缓冲液.扩增程序,94℃2.0 min;94℃1.0 min,38℃1.0 min,72 ℃ 1.5 min.5个循环;94℃1.0min,54℃1.0 min,72℃1.5 min,30个循环:72 ℃ 10.0 min.经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测,特征性条带清晰,信息量大,完全可以用于旱柳基因组的研究分析.

关键词：林木育种学、旱柳、相关序列扩增多态性(SRAP)、正交实验设计

所属期刊栏目：27

分类号：S722.3(造林学、林木育种及造林技术)

资助基金：十一五国家科技支撑计划项目2006BAD09A04

在线出版日期：2011-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：945-949