光皮桦SSR分子标记体系的建立

摘要：

采用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)-硅珠法提取光皮桦Betula luminifera嫩叶DNA,利用近缘种日本白桦B.platyphylla var.japonica和欧洲白桦B.pendula的引物,建立先皮桦简单重复序列标记(SSR)反应体系.在体系建立过程中,采用单因素法分别对影响聚合酶链式反应(PCR)反应的因素进行分析.结果表明:在20μL反应体系中,模板DNA用量、Mg2+浓度、脱氧核糖核苷酸(dNTPs)浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶用量分别为60ng,1.500mmol·L-1,0.175mmol·L-1,2.500 mmol·L-1,1.0×16.67 nkat时结果最好;引物退火温度比日本白桦扩增时提高1℃时效果佳.PCR扩增产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳后随机挑取其中3对引物扩增的多态性片段进行克隆测序,对引物的通用性做进一步检验,序列经比对后得到的与原物种序列相似度(max ident值)均在95.0%以上.可见,近缘种日本白桦和欧洲白桦的SSR引物可以在光皮桦上应用.

关键词：林木育种学、光皮桦、简单重复序列(SSR)分子标记

所属期刊栏目：27

分类号：S722(造林学、林木育种及造林技术)

资助基金：浙江省重大科技专项2008C02004-1

在线出版日期：2010-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：464-469