甜槠ISSR-PCR反应体系的正交优化

摘要：

对甜槠Castanopsis eyrei进行遗传多样性研究的过程中,为了获得清晰可靠、重复性强的ISSR扩增结果,利用正交设计对Mg2+,dNTP,引物,Taq酶,牛血清蛋白(BSA)和模板DNA等6种因素5个水平进行筛选和优化.确定甜槠ISSR-PCR最适宜反应体系为:10 μL反应体积中,1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol·L-1 Tris-HCl,pH 9.0,50 mmol·L-1 KCl,10 g·L-1 TritonX-100),1.7 mmol·L-1Mg2+,0.25 mmol·L-1 dNTP,8.34 nkat TaqDNA 聚合酶,1.5 g·L-1牛血清白蛋白,6 pmol引物,12 ng模板DNA.甜槠扩增时引物UBC846的最适退火温度为56.3 ℃.图2表1参23

关键词：植物学、ISSR-PCR、正交设计、优化、甜槠

所属期刊栏目：23

分类号：Q946;S792.17(植物学)

资助基金：国家自然科学基金Y504220

在线出版日期：2006-11-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：516-520