尼罗罗非鱼marco基因克隆、亚细胞定位及表达分析

摘要：

[目的]研究尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)胶原样结构巨噬细胞受体(macrophage receptor with collagenous structure,Marco)的结构特征和免疫功能,为揭示尼罗罗非鱼免疫应答机制提供理论基础.[方法]采用聚合酶链式反应从尼罗罗非鱼脾脏克隆marco基因序列,利用生物信息学和亚细胞定位等手段分析其结构特征,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测其表达情况.[结果]尼罗罗非鱼marco基因(Onmarco)的开放阅读框(open reading frame,ORF)长1071 bp,共编码356个氨基酸,具有跨膜结构域、典型的胶原样结构域和C端富半胱氨酸受体(scavenger receptor cystein-rich,SRCR)结构域;多序列比对和系统进化分析表明,Marco在硬骨鱼类中具有较高的保守性;亚细胞定位显示,尼罗罗非鱼Marco(OnMarco)在HEK-293T细胞中为全细胞分布,主要在细胞膜上表达;qRT-PCR结果显示,Onmarco在健康尼罗罗非鱼各组织中均有表达,但在血液中的表达量最高;经灭活的无乳链球菌和聚肌胞苷酸(Poly I:C)刺激后,Onmarco在罗非鱼肠道、头肾和脾脏中的表达量均呈时序性变化;用脂多糖(LPS)、Poly I:C和灭活后的无乳链球菌刺激罗非鱼头肾白细胞,Onmarco表达量均显著升高.[结论]Onmarco基因可能在鱼体抵御细菌和病毒入侵的免疫反应中发挥重要作用.

关键词：尼罗罗非鱼、marco、无乳链球菌、清道夫受体、亚细胞定位、表达分析

所属期刊栏目：42

分类号：Q78;Q959.483(基因工程（遗传工程）)

资助基金：广东省现代农业产业体系项目;广东省基础与应用基础研究基金项目

在线出版日期：2022-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：27-37