凡纳滨对虾含酪氨酸酶结构域血蓝蛋白的免疫功能

摘要：

[目的]克隆凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)一种新的含酪氨酸酶结构域血蓝蛋白(Tyrosinase-domain containing hemocyanin,TDCH),研究其免疫功能.[方法]根据NCBI上公布的tdch基因序列设计克隆引物,通过RT-PCR方法获得tdch的编码区;采用生物信息学方法分析tdch的结构特征;使用荧光定量PCR技术分析tdch在凡纳滨对虾12个组织中的表达,以及在副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、金黄色葡萄球菌(Staphhylococcu saureus)、黑曲霉菌(Aspergillus niger)、白斑综合征病毒、脂多糖及聚肌苷酸-聚胞苷酸[Poly(I:C)]刺激后在鳃和血细胞中的表达变化;利用RNAi技术敲降tdch在对虾中的表达,研究其在对虾抗副溶血弧菌免疫中的作用.[结果与结论]克隆获得tdch的编码区全长,编码551氨基酸的蛋白,理论分子质量为63.37 ku,等电点为7.74;tdch除含有血蓝蛋白结构域以外,还含有酪氨酸酶Tyrosinase结构域;tdch在对虾肌肉、肝胰腺、鳃、胃、表皮、触角、心脏、肠、幽门盲囊、眼柄和神经索中均有表达,眼柄中表达最高,在幽门盲囊中表达最低.Poly(I:C)刺激后,tdch在血细胞中的表达显著升高,在鳃组织中表达变化不明显;其余5种免疫原刺激后,tdch在鳃和血细胞中的表达均显著升高,沉默tdch的表达可导致副溶血弧菌感染对虾存活率显著下降,表明tdch参与了抗副溶血弧菌免疫应答.

关键词：凡纳滨对虾、含酪氨酸酶结构域血蓝蛋白、免疫刺激、副溶血弧菌、免疫应答

所属期刊栏目：42

分类号：S945.4+9(水产保护学)

资助基金：广东省基础与应用基础研究基金项目;中山大学中央高校基本科研业务费专项

在线出版日期：2022-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1-8