尼罗罗非鱼Galectin-4基因的原核表达及诱导条件优化

摘要：

[目的]研究尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)Galectin-4基因(记作OnGal-4)的原核表达,为大量获取尼罗罗非鱼Galectin-4蛋白(OnGal-4)和后续功能研究奠定基础.[方法]根据NCBI上公布的尼罗罗非鱼Galectin-4基因序列(Genbank:XM-019345120)设计引物,构建原核表达载体,诱导Galectin-4重组蛋白(rOnGal-4)在BL21原核表达系统中表达,并优化其诱导条件.[结果与结论]成功扩增出OnGal-4基因,并构建原核表达载体pGEX-4T-OnGal-4.rOnGal-4最佳诱导条件是温度28℃,IPTG浓度0.4 mmol/L,诱导时间4 h.在此条件下,rOnGal-4在可溶性蛋白中大量表达.Western-blot结果显示,rOnGal-4可与抗GST标签的单克隆抗体发生特异性反应.

关键词：尼罗罗非鱼、Galectin-4、基因克隆、原核表达、条件优化

所属期刊栏目：40

分类号：Q78;Q959.223+.63(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金青年基金项目;广东省科技厅国际科技合作领域项目;广东省普通高校青年创新人才类项目

在线出版日期：2020-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：118-123