10.3969/j.issn.1673-9159.2019.05.003
马氏珠母贝DNA甲基化转移酶Dnmt1的克隆及表达
[目的]对马氏珠母贝(Pinctada martensii)DNA甲基化转移酶1(DNA methyltransferase 1,Dnmt1)的基因全长及组织表达作分析,探究马氏珠母贝甲基转移酶Dnmt1(PmDnmt1)参与贝壳矿化调控机理.[方法]利用RACE技术获得PmDnmt1的cDNA序列全长,并对PmDnmt1的序列特征进行分析,同时利用逆转录-聚合酶链反应RT-PCR技术检测马氏珠母贝不同组织中PmDnmt1的表达情况.[结果与结论]PmDnmt1基因cDNA长4818 bp,其中,开放阅读框为4623 bp,编码1540个氨基酸.预测分子质量约为174.55 ku、理论等电点为5.89.结构域分析显示,PmDnmt1具有DMAP结合结构域、DNMT1-RFD结构域、锌指结构、BAH结构域和C5胞嘧啶DNA甲基化酶结构域等.多序列比对结果发现,Dnmt1在不同物种间具有较高保守性.实时荧光定量PCR分析显示PmDnmt1在所有检测组织中均有表达,在外套膜中央膜部分的表达量最高(P<0.05).PmDnmt1可通过调控外套膜的DNA甲基化修饰参与贝壳的形成.
马氏珠母贝、DNA甲基化转移酶、基因克隆、表达模式
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Q78(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金31672626
2019-10-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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