青鳉foxl2基因敲除突变体的构建与表型分析

摘要：

[目的]建立青鳉(Oryzias latipes)foxl2基因突变体材料,为阐释foxl2基因功能提供良好的动物模型和研究基础.[方法]利用CRISPR/Cas9技术敲除青鳉foxl2基因,建立突变体材料.观察foxl2基因突变体的第二性征、性腺等形态特征;组织学分析性腺结构与性腺中细胞类型;用定量PCR检测性腺发育相关基因的表达情况.[结果]通过CRISPR/Cas9技术成功敲除青鳉foxl2基因,建立foxl2基因缺失4个碱基的青鳉突变体.从第二性征与性腺表型上,foxl2-/-突变体均表现为生理雄性;组织切片分析发现,foxl2-/-突变体的性腺结构与野生型卵巢和野生型精巢均有显著差异,存在退化的核仁外周卵母细胞与精子,提示foxl2-/-的性腺在组织结构上类似精巢;定量PCR结果显示,foxl2-/-突变体中雄性性腺发育关键基因sox9b、gsdf、amh等的表达量升高,雌性性腺发育关键基因cyp19a1a等的表达量下降.[结论]通过CRISPR/Cas9技术成功建立青鳉foxl2基因缺失的突变体,foxl2-/-突变体有遗传雌性、生理雄性的表型特征,foxl2对维持青鳉性腺功能有重要作用.

关键词：青鳉、foxl2、基因敲除、CRISPR/Cas9、性腺发育

所属期刊栏目：39

分类号：Q78;Q959.471(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目31472263

在线出版日期：2019-05-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：20-30