10.3969/j.issn.1673-9159.2018.05.002
多鳞鱚不同组织荧光定量PCR内参基因筛选
[目的]筛选多鳞鱚(Sillago sihama)雌雄不同组织中稳定表达的内参基因.[方法]应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术定量分析多鳞鱚snrpd1、rps27、rpl7a、rpl7、cnpb、rps4、rps20、ef1a、ube2、rplp2等10个候选内参基因mRNA在雌、雄个体脑、鳃、性腺、心、肠、肾、肝、肌肉、皮肤、脾、胃等22个组织中的表达水平,通过BestKeeper、NormFinder、GeNorm工具测评10个内参基因表达的稳定性.[结果]10个候选内参基因均可获得特异性的扩增产物和理想的扩增效率,其中Bestkeeper软件计算候选内参基因稳定性由高到低的顺序为:snrpd1=rps27>rpl7a>rpl7>cnpb=rps4>rps20>ef1a>ube2>rplp2;NormFinder软件分析结果为:rpl7>rpl7a>rps27>rps4>cnpb>ef1a>rps20>ube2>rplp2>snrpd1;GeNorm软件分析结果为: rpl7/rpl7a>rps4>ef1a > rps27 > rps20 > cnpb> ube2 > rplp2 > snprd1.[结论]rpl7、rpl7a、rps27基因的表达稳定性较高,建议选择rpl7和rpl7a共同作为多鳞鱚qRT-PCR研究的内参基因.
多鳞鱚、荧光定量PCR、内参基因
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Q78;Q959.483.3(基因工程(遗传工程))
广东省科技计划项目2015A020209163、2014A020208117;广东省海洋渔业科技推广专项项目A201708A05;广东海洋大学博士启动项目
2018-12-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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