10.3969/j.issn.1673-9159.2018.05.001
金钱鱼cyp17a1基因克隆、组织分布及在卵巢发育中的表达
[目的]克隆金钱鱼cyp17a1基因,分析其在组织中的分布、卵巢不同发育时期中的表达变化,为金钱鱼繁殖生物学提供理论依据.[方法]通过金钱鱼转录组文库筛选和RT-PCR进行cyp17a1 cDNA序列扩增;用DNAstar软件比较Cyp17a1同源性,MEGA5.0构建系统进化树,RT-PCR检测cyp17a1组织表达,实时定量PCR检测不同卵巢发育时期cyp17a1的表达量.[结果]金钱鱼cyp17a1开放阅读框编码515个氨基酸残基;Cyp17a1氨基酸序列与同属鲈形目鱼类Cyp17a1同源性较高(87.8% ~ 92.7%),与大黄鱼最高(92.7%),与其他目鱼类同源性次之(72.7% ~ 85.0%),与硬骨鱼类Cyp17a2或Cyp17a1-like同源性最低(48.2% ~ 51.7%);所有硬骨鱼类Cyp17a1聚为一支,在Cyp17a1分支中,金钱鱼与鲈形目鱼类聚为一支;cyp17a1在性腺中表达量较高,在精巢中表达最强;在肝、脑和头肾表达较弱;在脾脏、肠、心脏、肌肉和鳃中未检测到表达;卵巢中cyp17a1的表达量随卵巢发育逐渐增加,Ⅳ期卵巢中cyp17a1表达量最高.[结论]cyp17a1在性腺中表达量较高,在金钱鱼卵巢发育过程中有重要作用.
金钱鱼、cyp17a1、基因克隆、组织分布、基因表达、卵巢发育
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Q78;Q959.483.3(基因工程(遗传工程))
大学生创新创业计划项目201610566007,201410566046;广东省自然科学基金2016A030313743,2017A030313101;广东省海洋与渔业局科技攻关与研发及技术推广项目A201608B01,2017A0012;国家自然科学基金项目.41706174, 31702326;湛江市科技攻关计划项目2016A03017
2018-12-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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