无乳链球菌sodA基因的克隆、序列分析及原核表达载体构建

摘要：

无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)是引起我国南方罗非鱼链球菌病的主要病原之一,SodA是无乳链球菌重要的毒力因子之一.根据链球菌sodA基因保守区设计引物,采用PCR扩增sodA基因部分序列,反向PCR和巢式PCR扩增其侧翼序列,成功获得无乳链球菌sodA基因.无乳链球菌sodA基因序列全长为699 bp,含开放阅读框609 bp,可编码202个氨基酸,演绎的SodA蛋白主要由α螺旋和不规则卷曲构成.BLAST分析表明,该蛋白氨基酸序列与犬链球菌(S.canis)及副乳房链球菌(S.parauberis)相应蛋白的氨基酸序列相似性分别高达80％和79％.将sodA基因克隆至原核表达载体pET28a上成功构建了重组质粒pET28a-sodA,导入Escherichia coli BL21 (DE3),诱导表达的重组蛋白质分子质量约为24 ku,主要以包涵体形式存在于表达菌中.

关键词：无乳链球菌、sodA基因、克隆、原核表达

所属期刊栏目：36

分类号：Q78;Q939.1(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金31302226

在线出版日期：2016-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：15-19