鱼类类立克次氏体PCR检测方法的建立及初步应用

摘要：

根据GenBank中类立克次氏体基因的保守序列，设计一对针对鱼类类立克次氏体PCR检测的特异性通用引物，通过对PCR扩增条件的优化，建立快速检测鱼类类立克次氏体的PCR方法，并用该方法对类立克次氏体阳性罗非鱼（Oreochromis nilotica）进行PCR扩增，结果得到与实验设计相符的390 bp的特异性扩增条带，而对健康罗非鱼、乌鳢（Ophiocephalus argus）、海鲈（Dicentrarchus labrax）、中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）及其他对照组的扩增结果为阴性。测序比对结果证实，该PCR方法检测结果准确，最低可检测出约1 pg的类立克次氏体质粒DNA；利用建立的PCR方法，对来自广东、云南、海南、天津、江苏、安徽、湖北等地的252份临床样品进行检测，共检出阳性样品30份，提示该PCR方法可用于类立克次氏体的临床快速检测。

关键词：鱼类类立克次氏体、PCR检测、临床应用

分类号：S941.4(水产保护学)

资助基金：山东省现代农业产业技术体系SDAIT-19；泰安市科技发展计划项目201440774；浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室开放基金项目J2013006

在线出版日期：2016-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：30-34