红笛鲷NCCRP-1基因原核表达条件的优化及纯化

摘要：

通过克隆编码红笛鲷(Lutjanus sanguineus)非特异性毒性细胞受体蛋白-1(nonspecific cytotoxic cell receptorprotein-1,NCCRP-1)成熟肽基因序列,然后与载体连接构建pET21a-NCCRP融合蛋白表达载体,将其转入大肠杆菌BL21进行诱导表达并优化条件.SDS-PAGE分析表明,在异丙基移-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度0.8 mmol/L、37℃条件下培养3 h后表达量最大,分子大小与预期值相符,融合蛋白主要以包涵体形式高效表达,通过HisTrap HP柱子使其得到进一步纯化;Western blot分析表明,该融合蛋白可与鼠抗His-tag单克隆抗体发生特异性结合,说明获得该表达产物.

关键词：红笛鲷、NCCRP-1基因、原核表达、条件优化、纯化

所属期刊栏目：30

分类号：S942.1+Q344+.13(水产保护学)

资助基金：国家自然科学基金"红笛鲷仔鱼抗菌免疫基因的克隆及表达时序研究"40906073

在线出版日期：2011-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：25-30