抗HSV-2单链抗体和碱性磷酸酶融合蛋白的制备

摘要：

将抗HSV-2糖蛋白B的单链抗体基因亚克隆入原核表达载体pLac-duet-1-AKP中构建了抗HSV-2单链抗体和碱性磷酸酶融合表达的原核表达载体pLac-H3-AKP.转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后SDS-PAGE显示在破菌沉淀中有符合预期大小的75 kD的表达带.结果表明抗HSV-2单链抗体和碱性磷酸酶融合蛋白在大肠杆菌中主要以没有生物活性的包涵体形式表达.用镍离子螯合层析纯化裂解后的包涵体,并初步探索了影响包涵体复性的因素.复性后的融合蛋白不仅能与HSV-2糖蛋白B抗原特异结合而且具有碱性磷酸酶活性,为快速检出抗原提供了一种有效的方法.

关键词：HSV-2、单链抗体、碱性磷酸酶、融合蛋白、金属螯合层析、蛋白复性

所属期刊栏目：42

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：浙江省大学生科技创新活动计划新苗人才计划资助项目2012R403078

在线出版日期：2014-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：45-49