纸纤维固定木瓜蛋白酶的研究及应用

摘要：

利用纸纤维为载体,制备高活性的固定化木瓜蛋白酶并应用于抗HCG抗体的水解.利用戊二醛交联法,制备固定化木瓜蛋白酶,并通过一系列优化,得到最佳固定化条件,包括pH、给酶量、温度、戊二醛体积分数,将制备的固定化木瓜蛋白酶应用于抗HCG抗体水解并制备F(ab')2片段.研究表明:反应温度为40℃时,固定化酶在pH5.0,0.01 mol/L的醋酸缓冲液条件下,给酶量为46 mg/g载体,戊二醛体积分数为0.01％时,固定化酶的酶活达到最高19 250 U/g,相对于优化前1 940 U/g提高了近10倍,成功应用于抗HCG抗体水解制备F(ab')2片段:经SDS-PAGE电泳检测,F(ab’)2片段达到电泳纯.ELISA反应检测表明:片段仍保留较高的活性,效价为1:12 000.

关键词：抗HCG抗体、固定化酶、木瓜蛋白酶、F(ab’)2片段、ELISA、纸纤维

所属期刊栏目：41

分类号：R981+.3

资助基金：浙江省科技厅资助项目2011C23070

在线出版日期：2013-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：147-151