10.3969/j.issn.1006-4303.2011.01.011
TRAIL胞外区编码基因的设计、人工合成及其表达
根据大肠杆菌密码子偏爱性要求,设计编码 TRAIL 胞外段(114~281氨基酸)的DNA序列,分段合成拼接引物并连接,得到目的基因,PCR 扩增后克隆于T载体中,经测序证实后,PCR 法在目的基因的5',末端引入肠激酶识别位点 EKsite 的编码序列,重纽于胞内融合表达型T栽体中,构建成pDsbA-6His-EKsite-TRAIL 胞内融合表达质粒,重组质粒转化表达宿主E.coli BL21(DE3).在33℃条件下,添加终浓度为0.4 mmol/L 的 IPTG 诱导表达,全菌 SDS-PAGE 分析结果表明:所构建的工程菌能表达44 kD左右的 TRAIL 融合蛋白,与理论值相符.
TRAIL、胞内融合表达、肠激酶、PCR
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X131.2(环境化学)
2011-06-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
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