提高碱性磷酸酶在E.coli胞内表达的可溶性及活性

摘要：

以E.coli DH5a基因组为模板PCR扩增得到无信号肽的碱性磷酸酶基因片段,与胞内融合表达型T栽体连接得到重组质粒,转化表达宿主E.coli BL21(DE3)和E.coli origami(DE3),经0.1 mM IPTG诱导表达,超声破碎细胞后,SDS-PAGE分析可溶性,融合蛋白在E.coli origami(DE3)中的可溶蛋白含量比E.coli BL21(DE3)中高.融合蛋白的可溶部分经Ni2+螯合亲和纯化,纯化后E.coli origami(DE3)中蛋白活性比E.coli BL21(DE3)中明显提高,达到1 614.3U/mg蛋白.

关键词：碱性磷酸酶、E.coli BL21(DE3)、E.coli origami(DE3)、可溶性、活性

所属期刊栏目：37

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：浙江省自然科学基金资助项目Y206760

在线出版日期：2009-11-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：372-375