猪圆环病毒3型衣壳蛋白通过抑制雷帕霉素靶蛋白的磷酸化诱导HEK293T细胞自噬
目的:探明猪圆环病毒3型衣壳(Cap)蛋白如何诱导细胞自噬.创新点:首次证明猪圆环病毒3型Cap蛋白诱导细胞自噬,泛素-蛋白酶体途径也参与其中.方法:构建过表达猪圆环病毒3型Cap蛋白的真核表达载体,转染HEK293T细胞,采用免疫印迹检测LC3、p62和mTOR等自噬通路的关键分子.利用激光扫描共聚焦显微镜和透射电镜,观察表达Cap蛋白的细胞是否有EGFP-LC3B点状聚集和自噬泡生成.利用氯喹抑制溶酶体酸化,探究衣壳蛋白是否诱导完整的自噬流.利用MG132抑制蛋白酶体途径,探究泛素-蛋白酶体途径是否参与自噬过程.结论:猪圆环病毒3型Cap蛋白通过抑制雷帕霉素靶蛋白的磷酸化诱导HEK293T细胞自噬,泛素-蛋白酶体途径也参与这一过程.
猪圆环病毒3型(PCV3)、衣壳(Cap)蛋白、自噬
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S852.65+9.2(动物医学(兽医学))
Project supported by the Zhejiang Provincial Department of Science and Technology No. 2018C02028
2020-07-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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560-570