驱动蛋白KIF4A通过调节肺耐药相关蛋白LRP的胞内运输参与肿瘤耐药
目的:探讨驱动蛋白KIF4A调节肺耐药相关蛋白LRP在细胞内分布的作用机制,及其在肿瘤耐药过程中的作用.创新点:首次发现驱动蛋白KIF4A的C端区与肺耐药相关蛋白LRP的N端区结合,且KIF4A调节LRP在胞内分布依赖KIF4A的N端马达结构域.方法:应用免疫共沉淀和免疫荧光技术检测KIF4A与LRP的结合.根据KIF4A及LRP蛋白结构,构建绿色荧光蛋白(GFP)融合KIF4A截短突变质粒及Flag融合LRP截短突变质粒,免疫沉淀分析KIF4A与LRP相互作用区域.通过RNA干涉(RNAi)内源KIF4A,外源转入KIF4A截短突变体质粒,检测LRP在胞内分布.结论:本实验中免疫沉淀及免疫荧光结果显示,KIF4A与LRP结合,且在微管上有共定位(图1).截短突变体免疫沉淀实验结果表明,KIF4A的C端尾部结构域与LRP的N端区结合(图2),RNAi敲降内源KIF4A表达导致LRP聚集在细胞核周围(图3),外源表达全长KIF4A可恢复LRP在胞内弥散状定位,但外源表达KIF4A的C端或N端截短突变无法恢复LRP的胞内定位,仍聚集在核周区域(图4).综上所述,驱动蛋白KIF4A可与LRP结合,并调节LRP在胞内定位,KIF4A的C端尾部结构域与LRP结合,N端马达结构域促进LRP在胞内运输,二者缺一不可.
驱动蛋白(KIF4A)、肺耐药相关蛋白(LRP)、耐药
18
Q291
2017-12-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共9页
1046-1054
