利用TaqMan微流控阵列同步检测多种动物源性成分

摘要：

利用TaqMan微流控阵列(TaqMan?array microfluidic card)技术,将24种(类)动物物种的实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)的引物探针集合在同一个阵列上,以实现多物种高通量同步检测,并对该方法的重复性、特异性和灵敏度进行验证.用变异系数(coefficient of variation,CV)表示一块阵列板内,同一物种成分检测的重复性.结果显示:66个CV值中,11个低于1％,15个大于2％,其余40个介于1％～2％之间,没有一个物种成分的CV值高于3％.P值显示的是不同阵列板间同一成分检测的重复性,22个物种成分的P值只有1个小于0.05,显示为板间存在差异,其他21种成分的板间差异均未达到显著水平.因此,本研究对多数物种成分的检测,不论板内还是板间都有较好的重复性.特异性检测中未发现TaqMan微流控阵列中出现假阳性的结果,但有2种成分的检测出现了假阴性.TaqMan微流控阵列的检测灵敏度没有高于单重荧光定量PCR,在22个检测样品中,10个物种成分检测的灵敏度降为原来的10％,1个甚至降低为原来的1％,其余11个灵敏度和单重荧光保持一致.总体而言,TaqMan微流控阵列技术在重复性、特异性和灵敏度方面都能满足物种成分真伪鉴定的需求,为同步鉴定多种动物源性成分提供了一种新的方法.

关键词：TaqMan微流控阵列、动物源性成分、同步检测

所属期刊栏目：46

分类号：TS207.7;Q81(食品工业)

资助基金：国家重点研发计划;浙江省重点研发计划;国家质量监督检验检疫总局科研项目;河南省科技攻关项目

在线出版日期：2020-05-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：189-200