免疫斑点法和免疫捕获RT-PCR检测黄瓜绿斑驳花叶病毒

摘要：

黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV)是葫芦科作物上重要的病毒之一.用提纯的黄瓜绿斑驳花叶病毒免疫新西兰大白兔制备CGMMV的多克隆抗体.该多克隆抗体的间接ELISA效价达1:512000,与CGMMV 17.5 ku外壳蛋白有特异性反应,而与烟草花叶病毒、齿兰环斑病毒和健康植物没有任何反应.用ACP-ELISA分析多抗灵敏度表明多抗检测1:40960倍稀释的CGMMV病叶时仍呈阳性反应.用该多抗建立了检测CGMMV的免疫斑点法(dot-ELISA)和免疫捕获RT-PCR方法(IC-RT-PCR).病叶汁液可被dot-ELISA检出的最大稀释度为1:10240.IC-RT-PCR从感染CGMMV的病叶组织中扩增到与预期大小相同的480 bp DNA条带,且当CGMMV病叶稀释1:163840倍时检测仍呈阳性.检测CGMMV的dot-ELISA和IC-RT-PCR方法的建立为该病毒病的诊断和控制提供了技术支撑.

关键词：黄瓜绿斑驳花叶病毒、多克隆抗体、dot-ELISA、IC-RT-PCR

所属期刊栏目：36

分类号：S432.41;S436.8;Q939.91(病虫害及其防治)

资助基金：浙江省自然科学基金重点资助项目Z3090039

在线出版日期：2010-11-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：485-490