齿兰环斑病毒外壳蛋白的原核表达、抗体制备及检测应用

摘要：

齿兰环斑病毒(Odontoglossum ringspot virus,ORSV)是感染兰花的主要病毒之一.用RT-PCR方法从感染ORSV兰花中克隆到该病毒的477 bp外壳蛋白基因(CP),外壳蛋白基因再亚克隆到原核表达载体pET-32a中构建重组原核表达载体pET-32a-CP;将重组表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,Ni2+-NTA亲和柱纯化获得分子量约为37 ku含硫氧还蛋白的融合蛋白.以纯化的重组蛋白为抗原免疫新西兰大白兔制备ORSV外壳蛋白的多克隆抗体,并用制备的多抗建立了可靠、灵敏、特异的检测ORSV的免疫捕获RT-PCR及dot-blot ELISA方法,为该兰花病毒病的诊断、兰花抗病育种和脱毒苗的建立打下了基础.

关键词：齿兰环斑病毒、原核表达、多克隆抗体、dot-blot ELISA、免疫捕获RT-PCR

所属期刊栏目：36

分类号：Q78;S432.4(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30670087;杭州市重大科技创新专项资助项目20080212A10

在线出版日期：2010-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：375-380