猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白特异性卵黄抗体的制备与鉴定

摘要：

将猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)核衣壳蛋白(nucleocapsid protein,NP)的基因片段克隆至载体pET-30a,转化重组质粒至Escherichia coli BL21(DE3)表达融合蛋白6×His-N,并以其为抗原免疫蛋鸡,制备特异性抗PRRSV-N卵黄抗体(egg yolk immunoglobulin,IgY).结果显示: 6×His-N在BL21中的表达量为60.2 mg·L-1;将纯化浓缩的6×His-N与弗氏佐剂乳化,连续3次免疫海兰蛋鸡后,经ELISA检测,首免后第36天抗6×His-N IgY抗体为阳性(P/N=2.44);第83天的P/N值达到最高,为5.63,抗体经1∶640稀释后,P/N值为2.29;经SDS-PAGE和Western blot分析,提取的卵黄抗体的纯度高且具有良好的免疫反应性.研究表明,抗PRRSV-N蛋白的IgY制备具有简便、成本低廉等特点,可用于PRRSV检测试剂盒的开发.

关键词：猪呼吸与繁殖综合征病毒、核衣壳蛋白、卵黄抗体、ELISA

所属期刊栏目：36

分类号：S852.4+3;Q785(动物医学（兽医学）)

资助基金：浙江省科技厅重大专项资助项目2007C12072

在线出版日期：2010-07-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：269-274