中华蜜蜂AccMRJP1基因克隆及在大肠杆菌中的表达

摘要：

根据中华蜜蜂AccMRJP1表达序列标签(EST)序列,从已完成EST测序的蜂脑cDNA文库中选出3个AccMRJP1克隆,通过PCR检测和测序筛选获得1个cDNA全长为1302 bp、可编码433个氨基酸残基的AccMRJP1开放阅读框(ORF),该氨基酸序列与已报道的AccMRJP1编码序列(AY279539)的同源性为99.8%.将该AccMRJP1基因克隆到表达载体pGEX-4T-2,转化大肠杆菌BL21中进行融合表达.SDS-PAGE电泳分析显示一条分子量大小约76 ku、占细胞总蛋白17.7%的特异性条带;以谷胱甘肽转移酶(GST)多克隆抗体为一抗作Western blot分析,检测到AccMRJP1与GST的融合表达蛋白印迹,并通过亲和柱分离获得了纯化的表达产物,证明AccMRJP1基因已表达成功,这为开展MRJP1的生物工程利用提供了技术基础.

关键词：中华蜜蜂、蜂王浆、AccMRJP1、基因克隆、原核表达

所属期刊栏目：36

分类号：Q781(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高技术研究发展计划"863"专题资助项目2007AA10Z324

在线出版日期：2010-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：119-124