芽孢杆菌植酸酶基因在毕赤酵母中的分泌表达

摘要：

根据枯草芽孢杆菌WHNB02植酸酶phyC基因全序列设计一对引物,采用PCR法从含有该基因的pUC18-phyC质粒上获得不含有信号肽序列的phyC基因表达片段,亚克隆到毕赤巴斯德表达载体pPIC9K的多克隆位点,并电转化毕赤巴斯德酵母GS115.经MD和MM平板筛选、酶活性测定,获得了阳性转化子PP9KC.首次在毕赤巴斯德酵母中实现了有生物学活性芽孢杆菌植酸酶的分泌表达,去糖基化试验表明该植酸酶的分子量为53.5 kD和50.9 kD糖基化程度不同的两种糖蛋白.用麦芽汁半合成培养基对PP9KC进行诱导培养,培养48 h后酶活可达到2453 U/mL,表达量为出发菌株的10.5倍.酶学性质分析表明,其酶促反应最适pH值为7.0,最适反应温度为65℃,经90℃处理10 min,残留酶活性为37℃时的78.2%.

关键词：芽孢杆菌、植酸酶、毕赤巴斯德酵母、分泌表达

所属期刊栏目：31

分类号：Q939.124;Q556.1;Q786(微生物学)

资助基金：国家科技攻关项目2002BA514A-12

在线出版日期：2005-11-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：621-627