circTNPO1通过下调miR－338－3p的表达促进骨肉瘤增殖迁移

摘要：

目的:探讨circTNPO1通过下调miR－338－3p的表达促进骨肉瘤细胞增殖迁移的作用及其分子机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应检测骨肉瘤细胞中circTNPO1、miR－338－3p、Ki－67和Vimentin的表达水平。构建circTNPO1稳定敲降的143B细胞系，细胞计数试剂盒8实验与细胞划痕实验检测细胞增殖迁移能力，荧光素酶报告基因实验验证circTNPO1与miR－338－3p的关系。建立裸鼠sh－circTNPO1 143B细胞皮下成瘤模型，瘤内注射miR－338－3p抑制剂与miR阴性对照，观察肿瘤重量与体积的变化。免疫组化法检测肿瘤组织中Ki－67的表达。结果:骨肉瘤细胞系U2OS、HOS、MG63、143B、ZOS和ZOSM中circTNPO1 mRNA表达水平分别为2.73±0.27、3.18±0.54、4.33±0.52、5.75±0.65、4.50±0.49和3.96±0.35，均高于成骨细胞hFOB1.19(1.00±0.09，均
P<0.05)。培养48和72 h后，sh－circTNPO1#1组143B细胞吸光度(
A)值分别为0.81±0.05和1.09±0.06，sh－circTNPO1#2组143B细胞
A值分别为0.84±0.04和1.2±0.04，均低于对照组(1.00±0.06和1.49±0.06，均
P<0.05)。转染48和72 h时，sh－circTNPO1#1+miR－338－3p抑制剂组143B细胞
A值分别为0.92±0.06和1.32±0.07，均高于sh－circTNPO1#1+miR阴性对照组(分别为0.82±0.04和1.07±0.08，均
P<0.05)。细胞划痕实验显示，sh－circTNPO1#1组和sh－circTNPO1#2组143B细胞迁移率分别为(24.43±2.15)%和(39.70±4.20)%，均低于对照组[(56.51±3.27)%，均
P<0.05]。sh－circTNPO1#1+miR－338－3p抑制剂组143B细胞迁移率[(46.10±5.71)%]高于sh－circTNPO1#1+miR阴性对照组[(26.70±2.21)%，
P＝0.005]。sh－circTNPO1#1+miR阴性对照组裸鼠肿瘤重量[(262.50±82.09)mg]与体积[(203.30±144.20)mm
3]均低于对照+miR阴性对照组[分别为(458.80±158.10)mg和(593.00±228.40)mm
3，均
P<0.05]。sh－circTNPO1#1+miR－338－3p抑制剂组裸鼠肿瘤重量[(395.40±137.60)mg]与体积[(488.60±208.60)mm
3]均高于sh－circTNPO1#1+miR阴性对照组(均
P<0.05)。
结论:circTNPO1通过靶向吸附miR－338－3p并下调miR－338－3p的表达促进骨肉瘤细胞的增殖与迁移，circTNPO1下调miR－338－3p可能是参与骨肉瘤进展的新机制。

关键词：骨肉瘤、circTNPO1、miR－338－3p、细胞增殖、细胞迁移

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资助基金：国家自然科学基金81802680;浙江省卫生厅临床研究应用项目2022KY1265;National Natural Science Foundation of China81802680;Clinical Research Application Project of Health Commission of Zhejiang Province2022KY1265

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：968-974