下调视黄醇结合蛋白2基因表达对顺铂耐药卵巢癌细胞生物学特性的影响及其机制

摘要：

目的:探讨下调视黄醇结合蛋白2(RBP2)基因表达对卵巢癌细胞生物学特性的影响及其机制。方法:建立稳定下调RBP2表达的顺铂(DDP)耐药卵巢癌细胞株SKOV3/DDP-RBP2i，并设置阴性对照组和空白对照组。采用细胞计数盒8(CCK-8)法检测细胞增殖能力，流式细胞术检测细胞凋亡情况，划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力，实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot法检测上皮-间质转化(EMT)相关分子标志物的表达。通过裸鼠移植瘤实验验证RBP2对卵巢癌生长的影响，采用美国TCGA数据库中的卵巢癌临床数据分析RBP2表达与肿瘤转移和患者预后的关系。结果:下调RBP2的表达后，SKOV3/DDP细胞的增殖能力明显下降，第5天时，SKOV3/DDP-RBP2i组、阴性对照组和空白对照组的增殖活性分别为(56.67±4.16)%、(84.67±3.51)%和(87.00±4.00)%，差异开始有统计学意义(
P<0.001)。SKOV3/DDP-RBP2i组的凋亡率为(14.19±1.50)%，高于阴性对照组[(8.77±0.75)%]和空白对照组[(7.48±0.52)%，
P<0.001]；侵袭细胞数为(55.20±2.39)个，低于阴性对照组和空白对照组[分别为(82.60±5.18)个和(80.80±7.26)个，
P<0.001)]；划痕愈合率为(28.47±2.72)%，低于阴性对照组和空白对照组[分别为(50.58±4.06)%和(48.92±4.63)%，
P<0.001]。SKOV3/DDP-RBP2i组细胞中E-cadherin的mRNA和蛋白表达量高于阴性对照组(
P＝0.015，
P<0.001)和空白对照组(
P＝0.006，
P<0.001)，N-cadherin的mRNA和蛋白表达量低于阴性对照组(
P＝0.012，
P<0.001)和空白对照组(
P＝0.005，
P<0.001)，vimentin的mRNA和蛋白表达量也低于阴性对照组(
P＝0.016，
P＝0.001)和空白对照组(
P＝0.011，
P＝0.001)。裸鼠接种细胞后，自第5周开始，SKOV3/DDP-RBP2i组、阴性对照组和空白对照组的肿瘤体积差异有统计学意义，SKOV3/DDP-RBP2i组的肿瘤体积小于阴性对照组和空白对照组(
P＝0.001)。生物信息学分析显示，发生转移的卵巢癌患者RBP2表达量高于未转移者(
P＝0.043)，RBP2高表达卵巢癌患者的生存时间(中位生存时间为41个月)短于RBP2低表达患者(中位生存时间为69个月，
P<0.001)。
结论:下调RBP2表达可抑制卵巢癌细胞的迁移和侵袭能力，其机制可能与抑制EMT有关。

关键词：卵巢肿瘤、沉默视黄醇结合蛋白2、迁移、侵袭、上皮-间质转化

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在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：139-146