核不均一核糖核蛋白A2/B1在非小细胞肺癌发病机制中作用的探讨

摘要：

目的 观察核不均一核糖核蛋白A2/B1(hnRNP A2/B1)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与DNA修复酶O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)、8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)、氧化还原因子1(Ref-1)、DNA依赖性蛋白激酶复合物DNA-PKcs和Ku mRNA之间的相互作用,并进一步探讨其在NSCLC发病机制中的作用.方法 采用免疫组化、Western blot及荧光实时定量PCR方法,检测NSCLC患者癌组织及正常肺组织hnRNP A2/B1的表达.采用免疫共沉淀结合逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,研究人肺鳞癌细胞株中hnRNP A2/B1蛋白是否与上述5种DNA修复酶的mRNA直接结合,然后采用免疫组化及荧光实时定量PCR方法,检测NSCLC患者癌组织及正常肺组织MGMT的表达情况.结果 免疫组化染色显示,hnRNP A2/B1定位于细胞核,hnRNPA2/B1在NSCLC癌组织中的表达阳性率(100%)和蛋白表达评分[(5.3±0.9)分]均显著高于正常肺组织[32%和(2.2±0.7)分,P＜0.01],在Ⅲ～Ⅳ期NSCLC组织中的表达略高于Ⅰ～Ⅱ期(P＜0.05),而与年龄、性别、组织学类型及吸烟状况无关(均P＞0.05).通过RT-PCR方法可以从人肺鳞癌细胞株免疫共沉淀产物中扩增出MGMT mRNA,提示hnRNP A2/B1与MGMT mRNA相结合.进一步的免疫组化染色结果显示,在NSCLC组织中,MGMT的表达阳性率为32.0%,明显低于正常肺组织(78.0%),蛋白表达评分[(2.2±0.8)分]也显著低于正常肺组织[(4.1±1.2)分,P＜0.01].荧光实时定量PCR结果显示,NSCLC组织中MGMT mRNA的表达量为1.8(0.6～3.1),明显低于正常肺组织[9.8(6.8～18.3),P＜0.01].结论 HnRNP A2/B1蛋白及mRNA在NSCLC组织中的表达均升高,hnRNP A2/B1与MGMT mRNA相结合,可能通过对MGMT mRNA的转录后调控参与NSCLC的发生.

关键词：癌、非小细胞肺、核不均一核糖核蛋白A2/B1、DNA修复酶、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶

所属期刊栏目：33

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：上海市复旦大学青年科学基金154;上海市卫生局科研课题2009020

在线出版日期：2011-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：110-114