喉癌细胞CD44+CD133+高致瘤亚群的生物学特性

摘要：

目的 筛选喉癌细胞中的高致瘤亚群,探讨其作为肿瘤干细胞的生物学特性.方法 原代培养喉癌细胞,采用流式细胞仪分选CD44+、CD133+、CD44+CD133+、CD44+CD133-细胞,并分别以1×106、1×105、1×104、1×102个/只接种于裸小鼠左腋皮下,观察各亚群成瘤时间、成瘤率、平均瘤重及肿瘤体积,筛选出在极低细胞浓度下的高致瘤亚群.采用Boyden小室体外侵袭实验,检测各亚群细胞的侵袭能力.采用免疫细胞化学染色检测各亚群细胞中干细胞抗原-1(SCA-1)及整合素β1的表达.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Westem blot法,检测各亚群细胞中Bmi-1基因的表达.结果 CD44+CD133+细胞以1×103个/只接种于裸小鼠,可以成瘤.当各亚群细胞以1×106个/只接种于裸小鼠4周后,CD44+CD133+细胞接种组棵小鼠的肿瘤体积和重量分别为(7726.81±196.93)mm3和(5.51±0.12)g,均大于CD44+、CD44+CD133-及未分选细胞接种组(均P<0.05),而与CD133+细胞接种组裸小鼠的肿瘤体积和重量差异无统计学意义(P>0.05).CD44+CD133+细胞24 h的侵袭细胞数为83.62±1.61,显著高于其他各亚群喉癌细胞.CD44+CD133+细胞高表达整合素β1和SCA-1.Bmi-1 mRNA在CD44+CD133+细胞中的表达水平为0.951±0.112,显著高于CD44+CD133-细胞和未分选的喉癌细胞(0.532±0.214和0.268±0.193,均P<0.01);Bmi-1蛋白在CD133+和CD44+CD133+细胞中高表达,而在CD44+、CD44+CDi33-和未分选的喉癌细胞中仅有少量表达.结论 CD44+CD133+喉癌细胞具有高致瘤性及肿瘤干细胞的生物学特性,可能是喉癌恶性增殖的根源,并有望成为喉癌治疗的新靶点.

关键词：喉肿瘤、肿瘤干细胞、致瘤性

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分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：吉林省科技厅重大社会发展项目20060416;吉林省科技厅应用基础项目200705194

在线出版日期：2009-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：99-103